Şam və sabun istehsalı üçün təmiz Saposhnikovia divaricata yağı topdan diffuzor efir yağı qamış yandırıcı diffuzorlar üçün yeni

qısa təsvir:

2.1. SDE-nin hazırlanması

SD-nin rizomları qurudulmuş ot kimi Hanherb Co.-dan (Guri, Koreya) alınmışdır. Bitki materialları Koreya Şərq Tibb İnstitutunun (KIOM) doktoru Go-Ya Choi tərəfindən taksonomik olaraq təsdiq edilmişdir. Çek nümunəsi (nömrə 2014 SDE-6) Koreya Standart Bitki Resursları Herbariumunda saxlanılmışdır. SD-nin qurudulmuş rizomları (320 q) iki dəfə 70% etanolla (2 saat geri axını ilə) ekstraksiya edildi və ekstrakt daha sonra azaldılmış təzyiq altında konsentrasiya edildi. Həlim süzülür, liofilizasiya edilir və 4°C temperaturda saxlanılır. Xam başlanğıc materiallardan qurudulmuş ekstraktın məhsuldarlığı 48,13% (w/w) təşkil etmişdir.

2.2. Kəmiyyət Yüksək Performanslı Maye Xromatoqrafiyası (HPLC) Təhlili

Xromatoqrafik analiz HPLC sistemi (Waters Co., Milford, MA, ABŞ) və fotodiod massiv detektoru ilə aparılmışdır. SDE-nin HPLC analizi üçün primer-O-glucosylcimifugin standartı Koreya Ənənəvi Tibb Sənayesini Təşviq İnstitutundan (Gyeongsan, Koreya) alınmışdır vəsek-O-qlükozilhamaudol və 4′-O-β-D-qlükozil-5-O-metilvisamminol laboratoriyamızda təcrid olunmuş və spektral analizlərlə, ilk növbədə NMR və MS ilə müəyyən edilmişdir.

SDE nümunələri (0,1 mq) 70% etanolda (10 ml) həll edildi. Xromatoqrafik ayırma XSelect HSS T3 C18 sütunu (4,6 × 250 mm, 5) ilə həyata keçirilib.μm, Waters Co., Milford, MA, ABŞ). Mobil faza asetonitril (A) və suda (B) 0,1% sirkə turşusundan 1,0 ml/dəq axın sürətindən ibarət idi. Çoxaddımlı gradient proqramı aşağıdakı kimi istifadə edilmişdir: 5% A (0 dəq), 5-20% A (0-10 dəq), 20% A (10-23 dəq) və 20-65% A (23-40 dəq) ). Aşkarlama dalğa uzunluğu 210-400 nm-də skan edilmiş və 254 nm-də qeydə alınmışdır. Enjeksiyonun həcmi 10,0 idiμL. Üç xromonun təyini üçün standart məhlullar son konsentrasiyada 7,781 mq/mL (prim-O-qlükozilsimifugin), 31,125 mq/mL (4′-O-β-D-qlükozil-5-O-metilvisamminol) və 31,125 mq/mL (sek-O-qlükosilhamaudol) metanolda və 4°C-də saxlanılır.

2.3. İltihab əleyhinə fəaliyyətin qiymətləndirilməsiIn Vitro

2.3.1. Hüceyrə Mədəniyyəti və Nümunə Müalicəsi

RAW 264.7 hüceyrə Amerika Tipi Mədəniyyət Kolleksiyasından (ATCC, Manassas, VA, ABŞ) əldə edilmiş və tərkibində 1% antibiotik və 5.5% FBS olan DMEM mühitində yetişdirilmişdir. Hüceyrələr 37°C-də 5% CO2 olan nəmləndirilmiş atmosferdə inkubasiya edilmişdir. Hüceyrələri stimullaşdırmaq üçün mühit təzə DMEM mühiti və lipopolisaxaridlə (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, ABŞ) 1 ilə əvəz edilmişdir.μSDE (200 və ya 400) varlığında və ya olmamasında g/mL əlavə edildiμg/ml) əlavə 24 saat ərzində.

2.3.2. Azot oksidinin (NO), Prostaqlandin E2 (PGE2), şiş nekrozu faktorunun təyini-α(TNF-α), və İnterleykin-6 (IL-6) istehsalı

Hüceyrələr SDE ilə müalicə olundu və 24 saat ərzində LPS ilə stimullaşdırıldı. NO istehsalı əvvəlki tədqiqata əsasən Griess reagentindən istifadə edərək nitritin ölçülməsi yolu ilə təhlil edilmişdir [12]. İltihabi sitokinlərin ifrazı PGE2, TNF-α, və IL-6 istehsalçının təlimatlarına uyğun olaraq ELISA dəsti (R&D sistemləri) istifadə edilməklə müəyyən edilmişdir. SDE-nin NO və sitokin istehsalına təsiri Wallac EnVision istifadə edərək 540 nm və ya 450 nm-də müəyyən edilmişdir.™mikroplata oxuyucusu (PerkinElmer).

2.4. Antiosteoartrit Fəaliyyətinin QiymətləndirilməsiIn Vivo

2.4.1. Heyvanlar

Erkək Sprague-Dawley siçovulları (7 həftəlik) Samtako Inc.-dən (Osan, Koreya) alınmış və 12 saatlıq işıq/qaranlıq dövrü ilə idarə olunan şəraitdə saxlanılmışdır.°C və% rütubət. Siçovullara laboratoriya pəhrizi və su verildiad libitum. Bütün eksperimental prosedurlar Milli Sağlamlıq İnstitutunun (NIH) təlimatlarına uyğun olaraq həyata keçirilmiş və Daejeon Universitetinin (Daejeon, Koreya Respublikası) Heyvanlara Baxım və İstifadə Komitəsi tərəfindən təsdiq edilmişdir.

2.4.2. Siçovullarda MİA ilə OA induksiyası

Tədqiqat başlamazdan əvvəl heyvanlar randomizə edildi və müalicə qruplarına təyin edildi (qrup başına). MİA məhlulu (3 mq/50μL 0,9% salin) ketamin və ksilazin qarışığı ilə induksiya edilmiş anesteziya altında birbaşa sağ dizin intraartikulyar boşluğuna yeridildi. Siçovullar təsadüfi olaraq dörd qrupa bölündü: (1) MİA inyeksiyası olmayan salin qrupu, (2) MİA inyeksiyası olan MİA qrupu, (3) SDE ilə müalicə olunan qrup (200 mq/kq) MİA inyeksiyası və (4) ) MİA inyeksiyası ilə indometazinlə (IM-) müalicə olunan qrup (2 mq/kq). Siçovullar 4 həftə ərzində MİA inyeksiyasından 1 həftə əvvəl SDE və IM ilə şifahi olaraq qəbul edildi. Bu işdə istifadə edilən SDE və İM dozası əvvəlki tədqiqatlarda istifadə edilənlərə əsaslanıb.10,13,14].

2.4.3. Arxa pəncənin çəkisinin paylanmasının ölçülməsi

OA induksiyasından sonra arxa pəncələrin çəki daşıma qabiliyyətinin orijinal tarazlığı pozuldu. Çəki daşıma dözümlülüyündəki dəyişiklikləri qiymətləndirmək üçün qeyri-kafilik test cihazı (Linton instrumentation, Norfolk, UK) istifadə edilmişdir. Siçovullar diqqətlə ölçmə kamerasına yerləşdirildi. Arxa əzanın çəkdiyi ağırlıq daşıyan qüvvə 3 s müddətində orta hesabla götürülüb. Çəki paylama nisbəti aşağıdakı tənliklə hesablanmışdır: [sağ arxa ətrafdakı çəki/(sağ arxa ətrafdakı çəki + sol arxa ətrafdakı çəki)] × 100 [15].

2.4.4. Serum sitokin səviyyələrinin ölçülməsi

Qan nümunələri 4°C-də 10 dəqiqə ərzində 1500 q-da sentrifuqa edilmişdir; sonra serum toplandı və istifadə olunana qədər -70°C-də saxlanıldı. IL-1 səviyyələriβ, IL-6, TNF-α, və serumdakı PGE2, istehsalçı təlimatlarına uyğun olaraq R&D Systems (Minneapolis, MN, ABŞ) şirkətinin ELISA dəstləri ilə ölçüldü.

2.4.5. Real-Time Kəmiyyət RT-PCR Analizi

Ümumi RNT TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ABŞ) istifadə edərək diz oynaq toxumasından çıxarılıb, cDNA-ya əks transkripsiya edilib və SYBR yaşıl (Applied Biosystems) ilə TM One Step RT PCR dəsti ilə PCR gücləndirilib. , Grand Island, NY, ABŞ). Real vaxtda kəmiyyət PCR Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR sistemindən (Applied Biosystems, Grand Island, NY, ABŞ) istifadə edilərək həyata keçirilib. Primer ardıcıllığı və zond ardıcıllığı Cədvəldə göstərilmişdir1. Nümunə cDNA-larının alikotları və bərabər miqdarda GAPDH cDNA istehsalçısının təlimatlarına (Applied Biosystems, Foster, CA, ABŞ) uyğun olaraq tərkibində DNT polimeraza olan TaqMan® Universal PCR master qarışığı ilə gücləndirildi. PCR şərtləri 40 dövr üçün 50°C-də 2 dəqiqə, 94°C-də 10 dəqiqə, 95°C-də 15 saniyə və 60°C-də 1 dəqiqə idi. Hədəf genin konsentrasiyası istehsalçının təlimatlarına uyğun olaraq müqayisəli Ct (amplifikasiya planı və eşik həddi arasında kəsişmə nöqtəsində eşik dövrünün sayı) üsulu ilə müəyyən edilmişdir.

FOB Qiymət:0,5 - 9,999 ABŞ dolları / Parça

Minimum Sifariş Miqdarı:100 ədəd/əd

Təchizat qabiliyyəti:Ayda 10000 Adet/Ped

Bizə e-poçt göndərin

Məhsul təfərrüatı

Məhsul Teqləri

Osteoartrit (OA) yaşlılarda ən çox rast gəlinən dayaq-hərəkət sistemi xəstəliyi və ən çox rast gəlinən degenerativ oynaq xəstəliyidir.1]. OA qismən zədə, qığırdaq strukturunun və funksiyasının itirilməsi, iltihaba qarşı və iltihabəleyhinə yolların tənzimlənməməsi nəticəsində yaranan bir vəziyyətdir.2,3]. O, ilk növbədə, sinovial oynaqların oynaq qığırdaqlarını və subxondral sümüyünü təsir edir və oynaq çatışmazlığına səbəb olur, bu da yerimə və ayaq üstə durma da daxil olmaqla, çəki götürdükdə ağrıya səbəb olur.4].

OA-nın müalicəsi yoxdur, çünki qığırdaq məhv olduqdan sonra onu bərpa etmək çox çətindir [5]. Müalicənin məqsədləri ağrıları aradan qaldırmaq, oynaqların hərəkətliliyini qorumaq və ya yaxşılaşdırmaq, oynaqların gücünü artırmaq və xəstəliyin əlillik təsirlərini minimuma endirməkdir. OA-nın farmakoloji müalicələri xəstənin birgə funksiyasını və həyat keyfiyyətini artırmaq üçün ağrıları azaltmaq məqsədi daşıyır. OA-da qığırdaq destruksiyasının əsas hadisəsi olsa da, kollagenin deqradasiyası OA-nın iltihabla birlikdə geri dönməz irəliləyişini müəyyən edən əsas hadisədir.6,7]. İltihab əleyhinə və xondroprotektiv fəaliyyətlə aparılan müalicələrin OA xəstələrində ağrıları aradan qaldırması və matrisin bütövlüyünü qoruması gözlənilir.

Buna görə də, iltihabın azaldılması OA idarəsində çox güman ki, faydalı olacaqdır. Son tədqiqatlar xondrositlərin iltihabının və qığırdaqların daha da məhv edilməsinin yumşaldılması baxımından OA-nın inkişafında bitki mənşəli mənbələrin qoruyucu rolunu təklif edir, onların oynaqlarla əlaqəli toxumalarla qarşılıqlı əlaqədə olması, nəticədə oynaq ağrılarının azalması ilə nəticələnir.8].

köküSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) Koreya və Çində baş ağrısı, ağrı, iltihab və artritin müalicəsi üçün ənənəvi tibbdə geniş istifadə edilmişdir.9,10]. Müxtəlif farmakoloji təsirləriSaposhnikovia divaricata(SD) həmçinin antiinflamatuar, analjezik, qızdırmasalıcı və antiartritik xüsusiyyətlərə malikdir [9,11]. Son bir araşdırma göstərdi ki, SD xromon ekstraktı kollagenin səbəb olduğu artritin siçan modelində potensial antirevmatoid artrit təsirlərinə malikdir.10]; lakin, antiinflamatuar və antiartrit fəaliyyətini dəstəkləmək üçün bir neçə tədqiqat aparılmışdırSaposhnikovia divaricataçıxarış (SDE).

Buna görə də, bu tədqiqat SD-nin 70% etanol ekstraktının antiinflamatuar və antiosteoartrit fəaliyyətini araşdırdı. Əvvəlcə SDE-nin antiinflamatuar təsiri qiymətləndirildiin vitroLPS-induksiya etdiyi RAW 264.7 hüceyrələrində. Daha sonra, SDE-nin antiosteoartrit təsiri, monosodium yodoasetat- (MIA-) səbəb olan OA-nın siçovul modelində çəki daşıyan paylanma, oynaq qığırdaqlarının deqradasiyası və iltihablı reaksiyaların qiymətləndirilməsi ilə ölçüldü.